什么是HIV病毒
人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus,HIV)属于逆转录病毒科慢病毒属,由HIV感染引起的以CD4+T淋巴细胞免疫功能缺陷为主的一种综合性免疫缺陷疾病称为获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS),即艾滋病。目前,艾滋病已成为严重威胁我国公众健康的重要公共卫生问题。
HIV可以分为HIV-1和HIV-2两种亚型,HIV-1广泛分布于全世界,毒力和传播力较高;HIV-2主要分布于非洲西部,毒力和传播力较弱。
HIV的感染现状
HIV感染分期
从HIV初始感染到终末期是一个复杂且漫长的过程,与HIV相关的临床表现也是多种多样。根据感染后临床表现及症状,HIV感染的全过程可分为急性期、无症状期和艾滋病病期。
急性期:通常发生在初次感染HIV后2-4周。部分感染者出现HIV病毒血症和免疫系统急性损伤所产生的临床表现。大部分患者症状轻微、无特异性,持续1-3周后可缓解。临床表现以发热最为常见,可伴有咽痛、盗汗、恶心、呕吐、腹泻、皮疹、关节疼痛、淋巴结肿大及神经系统症状。这一时期患者传染性高,血液中可检出HIV RNA和P24抗原,而HIV抗体则在感染后2周左右出现。
无症状期:此期持续时间一般为6-8年,其时间长短与感染病毒的数量和型别、感染途径、机体免疫状况的个体差异、营养条件及生活习惯等因素有关。在这一时期,由于HIV在感染者体内不断复制,免疫系统受损,CD4+T淋巴细胞计数逐渐下降。可出现淋巴结肿大等症状或体征,但一般不易引起重视。
艾滋病期:为感染HIV后的最终阶段,患者CD4+T淋巴细胞计数多<200个/ul,血液中HIV病毒载量明显升高。此期主要表现为HIV相关症状、体征及各种机会性感染和肿瘤。
HIV实验室检查
HIV/AIDS的实验室检测主要包括HIV抗体检测、HIV核酸定性和定量检测、CD4+T淋巴细胞计数、HIV耐药检测等。HIV-1/2抗体检测是HIV感染诊断的金标准,HIV核酸检测(定性和定量)也可用于HIV感染诊断;HIV核酸定量(病毒载量)和CD4+T淋巴细胞计数是判断疾病进展、临床用药、疗效和预后的两项重要指标;HIV耐药检测可为HARRT方案的选择和更换提供指导。
对于知晓感染状况,第一步进行HIV-1/2抗体检测。下面重点介绍HIV-1/2抗体检测。HIV-1/2抗体检测包括筛查试验和补充试验。
HIV-1/2抗体筛查方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、化学发光或免疫荧光试验、快速试验(斑点ELISA和斑点免疫胶体金或胶体硒、免疫层析等)、简单试验(明胶颗粒凝集试验)等。
HIV-1/2抗体筛查试剂从第一代HIV抗体筛查试剂问世,经历了第二代HIV抗体筛查试剂和第三代HIV抗体筛查试剂,其检测窗口期逐渐缩短。近年来,出现的HIV抗原抗体联合检测试剂,即第四代试剂,现已广泛地运用于临床,由于在检测中增加了HIV-1p24抗原,其窗口期明显缩短至2周,能够发现急性HIV感染者。
图1显示了整个HIV感染时期各种HIV检测方法的检出时间。目前,我国主要使用第三代HIV抗体筛查试剂和第四代HIV抗原抗体联合检测试剂,早发现,早治疗,可以减少患者的传染性,使患者长期处于无症状期,有利于患者的生存质量,因此,对于有条件的医疗机构推荐使用第四代HIV抗原抗体联合检测试剂作为筛查试剂。
第三代HIV抗体筛查试验结果无反应,报告“HIV抗体阴性”,见于未被HIV感染的个体,但窗口期感染者筛查试验也可呈现阴性反应。若结果有反应,用原有试剂双份/双孔或两种试剂进行重复检测,如果呈无反应,则报告为HIV抗体;如一个有反应一个无反应或均呈有反应,需要进行补充试验。
第四代HIV抗原抗体联合检测结果无反应,报告“HIV抗体阴性、HIV-1p24抗原阴性”。结果有反应,用抗体检测试剂进行复检试验,复检结果有反应,进行补充试验;复检结果无反应,进行HIV-1核酸试验、HIV-1 p24抗原试验或2-4周后随访。
补充试验分为抗体确证试验和HIV-1核酸试验。抗体确证试验包括免疫印迹试剂(WB)和条带/线性免疫试验(RIBA/LIA)等,抗体确证试验无特异性条带产生,报告HIV-1/2抗体阴性;出现条带但不满足诊断条件则报告不确定,可进行核酸试验或2-4周后随访;出现足够特异条带,出具HIV抗体阳性报告。HIV核酸试验:核酸定性检测结果阳性报告HIV-1核酸阳性,结果阴性报告HIV-1核酸阴性。病毒载量检测结果低于检测限,报告低于检测限;>5000拷贝/mL报告检测值;检测结果≤5000拷贝/mL,建议重新采样检测,临床医生可结合临床及流行病史、CD4+T淋巴细胞计数或HIV抗体随访检测结果等进行诊断或排除诊断。(来源:检验医学网;作者:四川大学华西医院实验医学科 陶传敏,教授、博士生导师)
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