揭秘“窗口期”（二）

 不同类型艾滋病检测试剂的差别主要体现在检测标志物和灵敏度上，在检测标志物和原理相同的前提下，不同品牌试剂的检测窗口期差异不明显。现介绍常用的几类检测方法。

 

1. HIV抗体检测

 

用于检测HIV抗体的传统方法是酶联免疫试验，其发展经历了以下阶段：

 

（1）第一代酶联免疫试验，原理为间接酶联免疫试验，抗原为病毒裂解产物，检测对象为IgG抗体；

（2）第二代酶联免疫试验，原理和检测对象不变，抗原改为重组蛋白或合成肽；

（3）第三代酶联免疫试验，原理改为双抗原夹心酶联免疫试验，抗原为重组蛋白或合成肽，检测对象包括IgG、IgM、IgA等所有抗体亚类，其中IgM抗体的出现时间比IgG抗体早。这三代方法的敏感性和特异性逐代提高，窗口期也逐代缩短，从约3个月缩短到约3周。

 

目前我国市场上的HIV抗体检测酶联免疫试剂全部为第三代。其他HIV抗体检测试剂（化学发光免疫试验、时间分辨免疫荧光试验、免疫层析试验等）的原理也是双抗原夹心法。这些HIV抗体检测试剂被作为艾滋病筛查试剂在艾滋病检测实验室广泛使用，但艾滋病检测点只能使用快速检测试剂（免疫层析试验等）。

 

如果HIV抗体筛查结果有反应，需要进一步做补充试验（包括HIV抗体确证试验和HIV核酸试验）。通常采用HIV抗体确证试验，确证试验阳性即可诊断为HIV感染。常见的HIV抗体确证检测方法有免疫印迹试验（WB）和条带/线性免疫试验（RIBA/LIA）。

 

2.  HIV抗原抗体检测

 

用于检测HIV抗原抗体的酶联免疫试验被称为第四代，其原理为双抗原夹心和双抗体夹心酶联免疫试验，可以同时检测HIV抗原和HIV抗体，窗口期比抗体检测试剂缩短了约1周。

 

其他HIV抗原抗体检测试剂（化学发光免疫试验、时间分辨免疫荧光试验、免疫层析试验等）的原理也是双抗原夹心和双抗体夹心法。酶联免疫试验和化学发光免疫试验广泛应用于除艾滋病检测点以外的艾滋病检测实验室,而时间分辨免疫荧光试验和免疫层析试验目前试剂品牌少、应用较少。

 

如果HIV抗原抗体筛查结果有反应，需要进一步做补充试验（包括HIV抗体确证试验和HIV核酸试验），通常采用HIV抗体确证检测。对于抗原有反应但抗体阴性或不确定的，需要进一步做HIV核酸检测或建议2～4周后随访。

 

由于HIV抗原在抗体出现以后被中和、难以检出，因此单纯的HIV抗原检测试剂不多，应用很少。

 

3.  HIV核酸检测

 

HIV核酸检测主要包括HIV RNA定量（病毒载量）检测和HIV定性检测，使用能检测RNA的试剂，窗口期可以缩短到1周左右。HIV RNA定量（病毒载量）检测长期用于抗病毒治疗效果和疾病进展的监测，现在也可用于感染诊断，检测结果大于5000 CPs/mL即判为核酸阳性。HIV定性检测有HIV RNA定性检测、HIV RNA和前病毒DNA定性检测、HIV前病毒DNA定性检测三种模式，其中HIV RNA定性检测主要在采供血机构用于血液筛查，一般与乙型肝炎病毒（HBV）DNA和丙型肝炎病毒（HCV）RNA检测联合使用，试剂不能用于感染诊断；HIV RNA和前病毒DNA定性检测及HIV前病毒DNA定性检测主要用于感染诊断，婴儿早期诊断最常用。

 

HIV核酸检测结果阴性不能排除HIV感染。如果在HIV核酸检测之前未做HIV抗体或HIV抗原抗体筛查，或者筛查检测结果为阴性，需要两次HIV核酸检测结果均为阳性、且有流行病学史或艾滋病相关临床表现才能诊断HIV感染